熔解曲线分析法用于RHD1227G＞A基因分型的实验研究

• 作者: 于卫建 刘铭 周世航 张开立 王霓 邵林楠
• 来源期刊: 中国输血杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时PCR 熔解曲线分析 Del RHD基因 RHD 1227A等位基因 基因分型
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 953-956
• 页数: 4页
• 分类号: R457.1+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2018.09.009

摘要

目的 建立用于RHD 1227G＞A基因分型的熔解曲线分析法.方法 设计合成RHD 1227G＞A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5'端加上不同长度的GC序列.在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G＞A基因分型.将建立的熔解曲线分析法与常规的PCR-SSP法比较.对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD 1227G＞A基因型.结果 应用熔解曲线分析法对84例标本进行基因分型,其中RHD 1227A+/G-32例,1227A-/G+ 22例,1227A+/G+6例,1227A-/G-24例.发现2例标本熔解曲线法检测的基因型为1227A+/G-,而PCR-SSP法检测结果为1227A +/G+.经基因测序证实这2例标本结果是1227A+/G-.结论 用于RHD 1227G＞A基因分型的熔解曲线法具有操作简单、快速、准确等优点,优于常规的PCR-SSP法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周世航		33	39	4.0	5.0
2	张开立	大连医科大学细胞生物学教研室	15	116	6.0	10.0
3	邵林楠		17	1	1.0	1.0
4	于卫建		35	60	4.0	6.0
5	刘铭	大连医科大学细胞生物学教研室	18	37	3.0	6.0
6	王霓		20	42	4.0	6.0