建立高分辨熔解曲线分析法检测SF3B1基因突变

• 作者: 姚冬明 李云 杨小飞 杨静 林江 王翠竹 肖高飞 钱军 陈星星
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨率熔解曲线分析 SF3B1 基因突变 骨髓增生异常综合征
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 49-52
• 页数: 4页
• 分类号: R393
• 字数: 2337字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立高分辨熔解曲线分析法(high-resolution melting analysis,HRMA),检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者中SF3B1基因的突变.方法:针对SF3B1基因热点突变位点(密码子E622、H662、K666和K700)设计PCR扩增引物,建立带有温度内标校准品的PCR扩增反应体系,对30例初诊MDS患者的骨髓标本进行PCR扩增,应用HRMA对相应PCR产物进行突变检测,并对HRMA检测结果进行DNA测序验证.结果:HRMA检测发现2例MDS患者存在异常的熔解曲线,经DNA测序验证1例为K666M杂合子突变,另l例为K700E杂合子突变.所建立的HRMA技术检测SF3B1基因突变的灵敏度为0.05(5％).结论:成功建立检测SF3B1基因突变的HRMA技术,可快速筛查MDS标本中的SF3B1基因突变.