稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株的建立

• 作者: 吴燕君 宋乐乐 应明真 彭小波 李洁 湛先保 詹丽杏 郭承涛
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-224 慢病毒载体 胰腺黏液性囊腺癌细胞株
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 721-725
• 页数: 5页
• 分类号: R735.9|R730
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2018.07.011

摘要

目的:构建hsa-microRNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株.方法:设计miR-224前体过表达基因片段,应用qRT-PCR法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析.用GV369-miR-224慢病毒感染胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞,建立稳定过表达miR-224的MCC1细胞株.荧光显微镜下观察GV369-NC及GV369-miR-224慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCC1、GV369-miR-224-MCC1和GV369-NC-MCC1组细胞中miR-224的表达水平.结果:成功构建GV369-miR-224慢病毒表达载体质粒.GV369-miR-224-MCC1、GV369-NC-MCC1细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光.miR-224表达水平在GV369-miR-224-MCC1细胞中显著高于阴性对照GV369-NC-MCC1细胞和空白对照MCC1细胞(23.45±1.94 vs2.11±0.38,1.46±0.11,均P＜0.01),而两组对照组之间miR-224表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论:成功构建稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株,为探讨miR-224在胰腺黏液性囊腺癌中的功能及发病机制提供新的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应明真	第二军医大学长海医院肿瘤科	30	101	5.0	8.0
2	李洁	第二军医大学长海医院肿瘤科	13	37	4.0	5.0
3	彭小波	第二军医大学长海医院肿瘤科	6	70	4.0	6.0
4	詹丽杏	中国科学院上海生命科学研究院营养所	2	1	1.0	1.0
5	郭承涛	第二军医大学长海医院肿瘤科	1	1	1.0	1.0
6	宋乐乐	中国科学院上海生命科学研究院营养所	1	1	1.0	1.0
7	吴燕君	中国科学院上海生命科学研究院营养所	1	1	1.0	1.0