稳定表达小鼠甘丙肽的N-2a细胞株的建立及内源性过表达甘丙肽对N-2a细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 刘田福 张锐虎 荣曼
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: N-2a 甘丙肽 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 524-529
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2013.05.008

摘要

目的 建立稳定表达小鼠甘丙肽(GAL)的N-2a细胞株GAL-N-2a,探讨内源性过表达的甘丙肽对N-2a细胞增殖和凋亡的影响.方法 脂质体法将重组载体PcDNA 3.1-PDGF-GAL转染N-2a细胞,通过G418筛选获得稳定过表达GAL的细胞克隆,利用PCR、反转录PCR 和Western blot法检测细胞中GAL在N-2a细胞的过表达,通过MTT 法检测N-2a细胞的增殖,借助流式细胞仪分别对过表达GAL的单克隆细胞进行细胞周期和细胞凋亡的检测.结果 稳定转染N-2a细胞即GAL-N-2a实现GAL基因的高表达,MTT法绘制细胞生长曲线实验显示转染重组质粒PcDNA 3.1-PDGF-GAL的N-2a细胞增殖速度显著低于对照组(P＜0.05),相比对照组未转染正常细胞,内源性过表达的GAL能使N-2a细胞周期阻滞在G0/G1期而且对N-2a细胞凋亡有明显的促进作用.结论 真核表达载体PcDNA 3.1-PDGF-GAL在转染N-2a细胞中可高表达GAL蛋白,并对N-2a细胞的增殖和凋亡均有影响,为进一步研究GAL的生物学作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘田福	山西医科大学实验动物中心	76	395	9.0	16.0
2	张锐虎	山西医科大学实验动物中心	18	45	4.0	6.0
3	荣曼	山西医科大学实验动物中心	4	6	1.0	2.0