禽腺病毒Hexon蛋白多克隆抗体制备及特异性鉴定

• 作者: 刘思当 商营利 孙伟 孙芹芹 张会霞 张桂华 牛玉娟 肖一红 赵君
• 来源期刊: 山东农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 禽腺病毒 Hexon基因 多克隆抗体 特异性
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 页码范围: 928-932
• 页数: 5页
• 分类号: S858|S852.4+3
• 字数: 3729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2324.2018.06.005

摘要

本研究旨在制备禽腺病毒(FAdV)Hexon蛋白多克隆抗体并对其特异性进行分析鉴定.通过构建重组的原核表达载体pET-28a-Hexon,转入表达菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导,并运用SDS-PAGE进行重组蛋白的鉴定,最后纯化蛋白.利用纯化的融合蛋白进行常规新西兰大白兔免疫,以制备Hexon蛋白的多克隆抗体.采用间接免疫荧光、免疫组织化学和Western blot的方法鉴定多克隆抗体的特异性.结果表明,Hexon蛋白的原核表达量较高,并且是以包涵体的形式存在,分子质量大小约为43 kDa;免疫兔后获得能与FAdV发生特异性反应且高效价的多克隆抗体.因此,本试验制备的FAdV Hexon蛋白的多克隆抗体证明特异性良好,为后期禽腺病毒病的诊断、致病机制研究及亚单位疫苗的研制提供了良好的物质基础.