骨形态发生蛋白-2单克隆抗体的制备及评价

• 作者: 刘启省 南南 张东刚 徐丽明 王金恒 陈亮
• 来源期刊: 药物分析杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 骨形态发生蛋白-2 (BMP-2) 重组人源BMP-2蛋白(rhBMP-2) 表位构相 特异性 骨修复材料 BMP-2含量
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 生物源医疗器械的检测与评价专栏
• 页码范围: 1310-1317
• 页数: 8页
• 分类号: R917
• 语种: 中文
• DOI: 10.16155/j.0254-1793.2018.08.04

摘要

目的:制备骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)单克隆抗体,并对其进行评价.方法:用重组人源BMP-2蛋白(rh BMP-2)对小鼠进行免疫;确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株;用间接竞争ELISA法筛选BMP-2阳性单克隆杂交瘤细胞;用常规Protein G进行纯化得到BMP-2单克隆抗体,并对其纯度、表位构相,特异性进行评价.结果:成功制备BMP-2单克隆抗体,其亚型为IgG2a,κ,纯化后的SDS-PAGE纯度大于90％.评价结果表明,本课题组研制的BMP-2抗体与rhBMP-2的结合位点为非线性表位,且特异性优于市售抗体,与BMP家族的BMP-4、BMP-5、BMP-7无交叉反应.结论:本课题组研制的单克隆抗体特异性好,效价高,可用于建立酶联免疫方法,检测骨修复材料中BMP-2含量.