结核杆菌CRISPR-associated Csm4(Rv2820c)诱导iNOS表达对耻垢杆菌胞内存活的影响

• 作者: 孙长峰 彭璇 杨国平 罗涛 翟小倩 鲍朗
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 结核Csm4基因 重组耻垢分枝杆菌 活性氮、氧环境 胞内生存
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 319-324
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的 研究Csm4蛋白在重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)中的表达及其影响胞内存活的机制.方法 PCR扩增Csm4基因,构建重组pMV261-Csm4穿梭表达质粒,将重组质粒和空白质粒电穿孔进MS生成重组菌MS_Csm4和对照重组菌MS_V,采用Western blot对重组菌Csm4蛋白表达进行检测.体外培养观察MS Csm4和MS_V生长曲线,并检测活性氮、活性氧环境下的集落形成单位(CFU)变化.MS_Csm4和MS_V重组菌感染人源巨噬细胞THP-1,计数CFU反映胞内存活,实时荧光定量PCR检测诱导性一氧化氮合酶基因(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达.硝酸还原酶法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放指标.结果 Csm4蛋白在MS Csm4中成功表达,且其表达不影响MS_Csm4的生长情况;MS_Csm4在体外活性氮、氧环境中CFU下降,与MS_V相比,差异有统计学意义(P＜0.05);重组菌MS_Csm4作用于THP-1细胞后诱导iNOS表达上调,促进NO的释放以及减少胞内生存,与MS_V相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重组菌MS_Csm4不能耐受体外活性氮、氧压力环境,可诱导宿主细胞iNOS表达上调,促进NO释放,从而影响其胞内生存能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	罗涛	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	10	10	2.0	3.0
3	翟小倩	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	2	1	1.0	1.0
4	彭璇	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	1	0	0.0	0.0
5	孙长峰	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	1	0	0.0	0.0
6	杨国平	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	3	1	1.0	1.0