噬菌体Bp7蛋白gp38的克隆、表达及其受体识别活性分析

• 作者: 任慧英 孙虎芝 张灿 麻海澜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体Bp7 gp38蛋白 序列分析 表达 免疫电镜 受体识别活性分析
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2461-2467
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.48
• 字数: 4503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.11.018

摘要

为了研究噬菌体Bp7蛋白gp38在噬菌体吸附宿主菌过程中的作用,PCR扩增gp38基因,对gp38蛋白氨基酸序列特征进行分析和同源性比对,构建重组表达质粒pColdTF-gp38,在E.coli BL21中诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot检测重组蛋白gp38的表达;亲和层析法纯化蛋白,制备gp38多克隆抗体.免疫电镜检测gp38在噬菌体Bp7表面的定位,蛋白竞争试验和抗体阻断试验测定gp38及其抗体对噬菌体Bp7吸附效率的影响.序列分析结果表明,gp38蛋白氨基酸序列与T4噬菌体无同源性,与噬菌体T2、T6有同源性,C端序列保守区与高变区间隔排列,呈现马赛克特征;构建的重组质粒pColdTF-gp38在E.coli BL21实现可溶性表达,制备的gp38多克隆抗体效价达1∶16;免疫电镜检测结果表明,gp38蛋白抗体能够与长尾丝结合,引起噬菌体Bp7的聚集;蛋白竞争试验和抗体阻断试验结果表明gp38蛋白及其抗体均能完全抑制噬菌体Bp7对宿主菌E.coliK12的吸附.以上研究结果表明,gp38是噬菌体Bp7的尾丝蛋白,位于长尾丝末端,作为受体识别蛋白在噬菌体Bp7吸附宿主菌过程中具有关键作用,这为进一步阐明宽宿主谱噬菌体Bp7识别受体的机制提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任慧英	青岛农业大学动物医学院	116	629	14.0	20.0
2	张灿	青岛农业大学动物医学院	46	118	6.0	9.0
3	孙虎芝	青岛农业大学动物医学院	8	16	2.0	4.0
4	麻海澜	青岛农业大学动物医学院	1	0	0.0	0.0