重组猪干扰素α6在毕赤酵母中表达及其活性研究

• 作者: 代洪波 卓秀萍 周远成 廖果 林艳 牛婷 王雪涛 蔡雨函 钟颖
• 来源期刊: 湖北畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 干扰素 重组猪干扰素α6 毕赤酵母 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: S859.1
• 字数: 2624字
• 语种: 中文

摘要

为获得稳定表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母.人工合成PoIFN-α6基因片段,连接至pPICZαA质粒,构建PoIFN-α6毕赤酵母表达质粒pPICZαA-PoIFNα6;经SacI酶线性化后转化至毕赤酵母X33感受态细胞,筛选阳性克隆;优化毕赤酵母表达条件,并对表达产物进行了体外抗病毒活性测定.结果表明,成功构建了表达重组猪α6干扰素的毕赤酵母,以1％甲醇诱导72 h后,菌体上清SDS-PAGE可见20 kDa左右目的条带,Western blot检测为阳性;表达的重组猪干扰素α活性在PRRSV/Marc-145、VSV/MDBK、PRV/Vero、PEDV/Vero、PPV/PK-15、PCV2/PK-15和TGEV/PK-15系统中均具有良好的抗病毒活性.说明PoIFN-α6在细胞上清中表达成功,并且在不同宿主细胞中均有抗病毒活性.