副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立

• 作者: 张培君 徐玉智 李淑芳 梅晨 王宏俊 龚玉梅
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 副鸡禽杆菌 16SrRNA 环介导等温扩增
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 47-51
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612|S854.44
• 字数: 3710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.01.008

摘要

应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法.利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16 S RNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立 LAMP的特异性和灵敏性.结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60 min,内引物1.60 pmol/μL、外引物0.20 pmol/μL.该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17 pg/反应,敏感性远高于常规 PCR的56 pg/反应.结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测.