基于CRISPR/Cas 9系统TMEM16A打靶基因的体外筛选

• 作者: 臧敦安
• 来源期刊: 中国保健营养
• 年，卷（期）: 2018,（19）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 57,60
• 页数: 2页
• 字数: 1986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7484.2018.19.065

摘要

目的:设计并验证能够高效切割TMEM16A位点的sgRNA,结合显微注射法与CRISPR/Cas9基因编辑技术,为TMEM16A基因敲除小鼠奠定基础.方法:使用预测软件设计TMEM16A位点的sgRNA,筛选得到脱靶效率最低的四条sgRNA,通过体外筛选得到稳定切割的两条sgRNA.结论:获得俩个能够引导高效切割的TMEM16A位点通用型sgRNA,从而为基因CRISPR技术在TMEM16A位点定点敲除基因奠定基础.sgRNA体外活性能够预测sgRNA在体内的切割活性,表明体外活性验证是筛选高活性sgRNA的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	臧敦安	中南民族大学生命科学学院	4	1	1.0	1.0