NPM1A型突变体对TGF-β1诱导K562细胞活力及AKT磷酸化水平的影响

• 作者: 吴正财 吴香新 林敏辉 王成艳 许昌声
• 来源期刊: 中华转移性肿瘤杂志
• 关键词: NPM1 K562细胞 TGF-β1 P-AKT 细胞活力
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-20
• 页数: 6页
• 字数: 3519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2096-5400.2019.01.004

摘要

目的 观察核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)A型突变体过表达对TGF-β1诱导的K562细胞活力及AKT磷酸化水平的影响.方法 将携带NPM1 A型突变体的腺病毒荧光载体(Ad5-NPM1)感染髓系白血病K562细胞,建立过表达NPM1蛋白的K562细胞株.利用Western blot法及ELISA法分别检测细胞NPM1蛋白表达及上清液蛋白含量;利用Western blot法检测TGF-β1处理对K562细胞AKT、P-AKT蛋白表达的影响.MTT法检测细胞活力;Western blot法测定细胞内NPM1、AKT、P-AKT蛋白水平.结果 重组腺病毒载体Ad5-NPM1感染K562细胞荧光强度随感染复数(multiplicity of infection,MOI,30～200)增加而增强,转染第3天即观察到细胞内绿色荧光信号.K562细胞NPM1蛋白表达水平呈Ad5-NPM1感染复数(30～200)依赖性增加(r=0.85),与空载组(Ad5-vector-100)相比,Ad5-NPM1-30、Ad5-NPM1-100组的NPM1蛋白表达水平均显著增高(P＜0.01).ELISA结果也显示K562细胞上清液NPM1蛋白水平呈Ad5-NPM1感染复数(30～200)依赖性增加(r=0.92),与空载组(Ad5-vector-100)相比,Ad5-NPM1-30、Ad5-NPM1-100组K562细胞上清液NPM1蛋白含量均显著增高(P＜0.01).TGF-β1(10 ng/ml)能够时间依赖性诱导K562细胞AKT蛋白磷酸化,但对总AKT水平没有明显影响.单TGF-β1处理组与TGF-β1(10 ng/ml)+ Ad5-Vector-100组细胞内P-AKT水平的差异无统计学显著性(P＞0.05),而TGF-β1(10 ng/ml)+Ad5-NPM1-100组K562细胞P-AKT水平显著高于单TGF-β1处理组(P＜0.05),各组总AKT水平未见明显差别(P＞0.05).与空白对照(CT)组相比,TGF-β1(10 ng/ml)处理可促进K562细胞的活力;但TGF-β1(10 ng/ml)+ Ad5-NPM1-100组细胞的活力水平明显高于单TGF-β1处理组(P＜0.01).结论 NPM1能促进TGF-β1诱导的K562细胞的活力.NPM1促进TGF-β1诱导的K562细胞的生长可能与AKT磷酸化有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许昌声	福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所	103	593	13.0	18.0
2	林敏辉	福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所	6	22	3.0	4.0
3	吴香新	福建医科大学实验动物中心	10	30	3.0	5.0
4	吴正财	福建医科大学实验动物中心	8	22	3.0	4.0
5	王成艳	福建医科大学实验动物中心	8	7	2.0	2.0