重组蛋白ApSerpin-FA72的包涵体复性及活性研究

• 作者: 刘忠渊 刘阳 张蕊 贾洋洋
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 丝氨酸蛋白酶抑制剂 复性 包涵体 活性检测
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 456-462,469
• 页数: 8页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.05.0076

摘要

[目的]原核表达及制备重组光滑鳖甲丝氨酸蛋白酶抑制剂(ApSerpin-FA72),探索包涵体最优复性条件与最适酶反应条件.[方法]采用超声破碎获得大量包涵体,通过包涵体的洗涤、包涵体的溶解方法对包涵体进行纯化,获得高纯度的包涵体进行复性液成分与复性方法的摸索.测定TrxA-ApSerpin-FA72对胰蛋白酶的IC50、最适反应pH和最适反应温度.[结果]在32 ℃、180 r/min、0.4 mmol/L IPTG浓度下以沉淀形式表达大量蛋白,通过包涵体复性在含有L-精氨酸复性液中获得有生物活性的TrxA-ApSerpin-FA72,对胰蛋白酶的IC50为0.48 μmol/L,pH在7～9,温度在60℃时有较高的抑制活性.[结论]L-精氨酸是复性液中重要的组成部分,复性的重组蛋白TrxA-ApSerpin-FA72对胰蛋白酶有较强的抑制能力,是一种热稳定较好的弱碱性胰蛋白酶抑制剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘忠渊		43	298	9.0	16.0
2	张蕊		2	0	0.0	0.0
3	刘阳		3	1	1.0	1.0
4	贾洋洋		1	0	0.0	0.0