基于荧光素酶双报告基因系统体外验证长爪沙鼠 Cip4基因受RXR及T4调控

• 作者: 刘月环 王志远
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 非酒精性脂肪性肝病模型 长爪沙鼠 Cip4基因 荧光素酶双报告基因系统 维甲酸X受体(RXR) 甲状腺素受体B(TRB)
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 78-84
• 页数: 7页
• 分类号: R-33
• 字数: 4678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2019.11.012

摘要

目的 探讨核转录因子TRB、RXR和激动剂T4对长爪沙鼠Cip4基因表达的调控作用.方法 合成长爪沙鼠Cip4基因启动子区序列,构建报告载体pGL3-Cip4;将转录因子TRB、RXR克隆到pcDNA3.1表达载体上.将pGL3-Cip4,pcDNA3.1-TRB,pcDNA3.1-RXR和pRL-TK(参照质粒)载体共转染到HEK-293细胞,构建Cip4基因的荧光素酶双报告系统.观察质粒用量、TRB的激动剂甲状腺素T4等处理对转录活性的影响.结果 以长爪沙鼠Cip4启动子区为启动序列的双荧光素酶报告基因系统在(启动子+转录因子):pRL-TK=20:1、总质粒量为2μg时转染效率最高,并具有最高的荧光素酶活性.检测结果显示,仅加入TRB不改变Cip4的转录水平(P>0.05),仅加入RXR可以增加Cip4的转录水平(P<0.05),RXR与T4共同作用可上调Cip4的转录水平(P<0.001).TRB与T4共同作用可下调Cip4活性(P<0.05).RXR、TRB、T4共存时,Cip4的转录水平显著下调(P<0.01).结论 本研究证实了T4、TRB及RXR共调控长爪沙鼠Cip4基因的转录,模拟了配体激活型转录因子TRB/RXR活化目的基因Cip4的转录,同时证实了Cip4的转录活化与RXR信号通路密切相关,为揭示甲状腺素在人类NAFLD中的作用机制奠定了基础.本报告基因系统可用于配体激活型转录因子调控Cip4基因表达的机理分析及相关药物的筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘月环		29	87	5.0	8.0
2	王志远		13	8	2.0	2.0