A KT23′-U TR荧光素酶报告基因载体构建及与miRNA-625靶向关系验证

• 作者: 卞秀娟 邓霞 钱粉红 魏斌
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-625 AKT2基因 荧光素酶报告基因 3′端非翻译区
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 204-207
• 页数: 4页
• 分类号: R393
• 字数: 2896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y160052

摘要

目的：通过构建荧光素酶报告基因重组质粒验证miRNA-625与AKT2基因的靶向调控关系。方法：通过生物信息学软件预测AKT2为miRNA-625靶基因；构建野生型AKT2基因3′端非翻译区荧光素酶报告基因载体及miR-NA-625靶序列突变型载体；将HEK-293T细胞株随机分为野生型＋miRNA-625组、野生型＋miRNA内参组、突变型＋miRNA-625组、突变型＋miRNA内参组；Lipofectamine 2000转染相应的质粒与miRNA，双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果：构建野生型及突变型荧光素酶报告载体鉴定正确，双荧光素酶报告基因检测系统显示野生型＋miRNA-625组相对荧光素酶活性较野生型＋miRNA内参组明显降低（t＝14．1764，P＜0．05）。结论：miRNA-625对野生型AKT2重组质粒荧光活性有明显的抑制作用，证实miRNA-625能够靶向调控AKT2基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏斌	江苏大学附属医院呼吸内科	3	10	1.0	3.0
2	邓霞	江苏大学附属医院呼吸内科	4	12	2.0	3.0
3	卞秀娟	江苏大学附属医院呼吸内科	6	24	3.0	4.0
4	钱粉红	江苏大学附属医院呼吸内科	14	34	4.0	5.0