p53基因3'UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其 与miRNA-2127靶向关系的验证

• 作者: 孟凯 张玉霞 王友令 袁小远
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: p53 miRNA-2127 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术·遗传育种·种质资源
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: S813.10
• 字数: 2748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2019.01.003

摘要

为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中,构建野生型与突变型重组双荧光素酶报告质粒.将293 T细胞分为4组,分别共转染野生型报告质粒+阴性对照(NC)、野生型报告质粒+miRNA-2127、突变型报告质粒+NC、突变型报告质粒+miRNA-2127.检测各组细胞中荧光素酶活性差异,结果显示:共转染了野生型报告质粒+miRNA-2127的293T细胞与共转染了野生型报告质粒+NC组相比,荧光素酶活性显著降低(P<0.05);且突变型报告质粒+miRNA-2127组的相对荧光素酶活性显著高于野生型报告质粒+miRNA-2127(P<0.05),说明miRNA-2127能够靶向调控p53基因,且结合位点位于3'UTR区369—375间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁小远	山东省农业科学院家禽研究所	43	189	7.0	12.0
2	王友令	山东省农业科学院家禽研究所	65	285	10.0	15.0
3	张玉霞	山东省农业科学院家禽研究所	31	68	5.0	7.0
4	孟凯	山东省农业科学院家禽研究所	12	5	1.0	1.0