CLPTM1L与miR-494靶向关系的双荧光素酶报告实验验证

• 作者: 张仁 张圣洁 张学研 李彤 臧文巧
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: miR-494 CLPTM1L 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 应用研究
• 页码范围: 430-433
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2015.03.033

摘要

目的:确定miR-494与CLPTM1L的靶向关系.方法:采用生物信息学方法预测miR-494与CLPTM1L基因的结合位点.采用PCR技术扩增CLPTM1L基因3'UTR片段,并克隆至pmirGLO载体,构建野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒.将培养的293T细胞分为4组,分别共转染miR-494或阴性对照和pmirGLO-CLPTM1L-W 3'UTR或pmirGLO-CLPTM1L-M 3'UTR,检测4组细胞中荧光素酶活性.结果:酶切和测序证实成功构建了野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒pmirGLO-CLPTM1 L-W 3'UTR和pmirGLO-CLPTM1L-M 3'UTR;与共转染miR-494 mimics和突变型CLPTM1L3'UTR质粒的293T细胞中荧光素酶活性(1.056 4±0.163 4)、共转染阴性对照序列和突变质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.961 3±0.177 9)或野生型质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.983 4±0.001 2)相比,共转染miR-494 mimics和野生型CLPTM1L 3'UTR质粒的293T细胞中荧光素酶活性(0.651 6±0.136 4)明显降低(F =4.476,P=0.040),其他3组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CLPTM1L与miR-494存在靶向关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	臧文巧	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	30	86	6.0	7.0
2	李彤	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	16	42	4.0	6.0
3	张仁	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	1	5	1.0	1.0
4	张圣洁	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	2	5	1.0	2.0
5	张学研	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	1	5	1.0	1.0