HIPK3基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与靶向miR-146的验证

• 作者: 刘昉 强郑 杨开雯 靳文雨
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: miR-146 同源性的蛋白质激酶3 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 439-444
• 页数: 6页
• 分类号: R394
• 字数: 2528字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2018.04.004

摘要

目的 构建 HIPK3基因3′非编码区(3′UTR)双荧光素酶报告质粒,分析 miR-146对HIPK3的调控作用.方法 通过miRDB 数据库和DIANA TOOLS数据库预测miR-146与HIPK3基因的结合位点.将HIPK3基因的3′UTR序列以及其突变体插入至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2,构建野生型(HIPK3-WT)及突变型HIPK3-MU)重组双荧光素酶报告质粒.将培养的293T 细胞分为6组,1)HIPK3-WT+NC 阴性对照;2)HIPK3-WT+miR-146a mimics;3)HIPK3-WT+miR-146b mimics;4)HIPK3-MU+NC阴性对照;5)HIPK3-MU+miR-146a mimics;6)HIPK3-MU+miR-146b mimics,48 h后检测6组细胞中荧光素酶活性.结果 成功构建了HIPK3-WT及HIPK3-MU重组双荧光素酶报告质粒;HIPK3-WT和miR-146b mimics共转染293T细胞后,荧光素酶活性降低(P<0.05).结论 miR-146a 与HIPK3基因不存在靶向关系,miR-146b可以调控HIPK3基因3′UTR.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨开雯	桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室	3	8	2.0	2.0
2	强郑	桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室	5	8	2.0	2.0
3	靳文雨	桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室	5	11	2.0	3.0
4	刘昉	桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室	5	8	2.0	2.0