猪VEGFA3'UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证

• 作者: 张金璧 李齐发 高晓梦
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 VEGFA microRNAs miR-361-5p 3'非翻译区 双荧光素酶报告载体
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S828
• 字数: 3729字
• 语种: 中文

摘要

为了扩增并分析猪卵泡颗粒细胞中血管内皮生长因子A (VEGFA)基因3编码区(3'UTR)序列、构建VEGFA 3'UTR荧光素酶报告质粒以及利用双荧光素酶报告基因验证miR-361-5p与VEGFA 3'UTR的靶向关系,试验通过RT-PCR扩增VEGFA 3'UTR,并用生物信息学方法分析预测其保守性及潜在的互作miRNA,最后将扩增的VEGFA 3'UTR序列克隆至荧光素酶报告载体中,与miR-361-5p mimics(试验组)或NC mimics(对照组)共同转染293细胞,通过双荧光素酶报告系统检测两组细胞的荧光素酶活性,从而鉴定miR-361-5p与VEGFA 3'UTR的靶向关系.结果 表明:在猪卵泡颗粒细胞中成功扩增了VEGFA基因3'UTR序列,其在哺乳动物中保守性较高,有多个潜在miRNA结合位点;成功构建了VEGFA基因3'UTR荧光素酶报告质粒,证明了miR-361-5p可以直接作用于VEGFA基因3'UTR,抑制其荧光素酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李齐发	南京农业大学动物科技学院	51	685	17.0	25.0
2	张金璧	南京农业大学动物科技学院	5	39	2.0	5.0
3	高晓梦	南京农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0