板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性

• 作者: 于卫立 刘坤璐 单俊杰 李海霞 武军华 王勃 王玉霞 胡涛 贾培媛
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 板蓝根 多糖 佐剂 抗体
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-29
• 页数: 8页
• 分类号: R967
• 字数: 4548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2019.01.004

摘要

目的 研究板蓝根中均一多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性.方法 ① 分别用钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,与IIP-A-1和IIP-2分别偶联,制备免疫抗原KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2及检测抗原BSA-IIP-A-1和BSA-IIP-2.KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2(每只家兔300μg)分别与弗氏佐剂(每只0.65 mL)联用,皮内注射免疫家兔2次,间隔28 d;第2次免疫后14 d,分别用KLH,BSA和BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-25 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测家兔血清中抗IIP-A-1和IIP-2抗体.②IIP-A-1和IIP-2(每只500μg)分别im免疫小鼠3次,每次间隔28 d;每次免疫后14 d,用BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-25 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体.③IIP-A-1和IIP-2为佐剂(每只200μg),分别配伍口蹄疫病毒灭活疫苗(Aftosa,每只2μg)im免疫小鼠2次;IIP-2(每只200μg)配伍H1N1病毒裂解疫苗(每只3μg)im免疫3次,配伍乙肝病毒重组亚单位蛋白乙肝病毒表面抗原(HBsAg,每只2μg)im免疫小鼠2次;每次间隔28 d.末次免疫后14 d,用KLH-IIP-A-1或KLH-IIP-22 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体.结果 ①KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2分别与弗氏佐剂联用免疫家兔2次,可产生抗KLH,IIP-A-1或IIP-2抗体,抗KLH滴度≥1:50000,抗IIP-A-1抗体滴度≥1:20000,抗IIP-2抗体滴度≥1:100000.②IIP-A-1和IIP-2分别单独肌注免疫小鼠3次,仅检测出抗IIP-2 IgG1抗体,滴度为1:1000.③IIP-A-1作为佐剂配伍Aftosa疫苗免疫小鼠后,未检测出抗IIP-A-1 IgG1抗体.IIP-2作为佐剂分别配伍H1N1和Aftosa疫苗免疫小鼠后,均可检测出抗IIP-2 IgG1抗体,滴度均为1:400;配伍HBsAg抗原免疫小鼠后,检测出低水平的抗IIP-2 IgG1抗体,滴度为1:100.结论 作为半抗原,板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2连接KLH后,可刺激家兔产生高滴度的抗IIP-A-1和IIP-2抗体.作为佐剂,IIP-A-1无免疫原性;IIP-2具有一定的免疫原性,分别与Aftosa疫苗、H1N1病毒裂解疫苗和HbsAg配伍免疫小鼠,均产生抗IIP-2 IgG1型抗体.