乙型肝炎病毒核酸实时荧光PCR超敏检测方法的建立与评价

• 作者: 夏乔 廖丽丽 杨鸿辉 董志强 蒋析文
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: HBVDNA Taq?man 实时荧光PCR 相关性
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 348-354,378
• 页数: 8页
• 字数: 4840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6929.2019.05.003

摘要

目的 应用Taq?man实时荧光PCR技术,建立一种超敏检测乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)载量的方法(以下简称超敏试剂),并对其临床应用进行评价.方法 对比GeneBank中HBV DNA基因组序列,使用Primer 5.0软件在其S区和C区分别设计一对特异性的引物和探针,应用Taq?man探针技术,优化反应体系和反应条件.并收集195例临床样本与某国产试剂进行平行检测,采用相关性分析和Bland?Altman等方法对检测结果进行分析.结果 建立的HBV DNA超敏检测方法灵敏度达10 IU/mL,线性范围20～1×109 IU/mL,准确性为100％,覆盖型别为A、B、C、D、E、F、H,批内和批间变异系数在5％以内.195例临床样本检测结果显示,与某国产试剂相比,超敏试剂的阳性符合率为99.45％,阴性符合率为91.67％,总符合率为98.97％(Kappa值为0.9112,P<0.05).超敏试剂与某国产试剂具有很强的相关性(r=0.9791,P<0.0001).结论 本研究成功建立了一种HBV DNA实时荧光PCR检测方法,具有很高的临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋析文		7	14	3.0	3.0
2	夏乔		1	1	1.0	1.0
3	廖丽丽		1	1	1.0	1.0
4	董志强		1	1	1.0	1.0
5	杨鸿辉		1	1	1.0	1.0