S-亚胺还原酶和葡萄糖脱氢酶共表达系统的构建及手性胺的合成

• 作者: 余磊 李京美 李骥璇 王洪钟 郑桂兰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 亚胺还原酶 葡萄糖脱氢酶 共表达 手性胺
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 105-111
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0806

摘要

旨在构建S-亚胺还原酶(S-IRED)和葡萄糖脱氢酶(GDH)在大肠杆菌中的一菌双酶共表达系统,实现辅酶NADPH的再生,高效合成手性仲胺.利用无缝克隆的手段设计构建一种单质粒双启动子共表达系统,以全细胞为催化剂催化手性仲胺S-2-甲基吡咯烷(S-2MP)的合成,并研究温度、pH及有机溶剂对双酶反应的影响.成功构建了S-IRED和GDH的重组共表达质粒,实现了S-IRED与GDH在大肠杆菌中的胞内共表达,以亚胺2-甲基吡咯啉(2MPN)为模式底物,以工程菌全细胞催化手性仲胺S-2MP的合成,在低辅酶添加时催化手性胺的产率和光学纯度均高于95％.该双酶共表达体系的最适温度和pH分别为37℃和pH 8,10％ 以下的甲醇对双酶反应有正向促进作用.大肠杆菌胞内双酶共表达系统的构建实现了辅酶NADPH的原位再生,降低了亚胺还原酶催化合成手性胺的成本,为手性胺的规模制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪钟	清华大学生命科学学院	27	137	6.0	11.0
2	郑桂兰	清华大学生命科学学院	10	52	3.0	7.0
3	余磊	清华大学生命科学学院	11	54	5.0	7.0
4	李京美	清华大学生命科学学院	5	40	3.0	5.0
5	李骥璇	清华大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0