羰基还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达及其在不对称还原产麻黄碱中的初步应用

• 作者: 宇文伟刚 张梁 王正祥 石贵阳
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: 羰基还原酶 葡萄糖脱氢酶 辅酶再生 共表达 d-伪麻黄碱 全细胞转化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 19-24
• 分类号: TS2
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2010.03.004

摘要

通过羰基还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达,解决羰基还原酶在催化底物过程中的辅酶再生的问题.以枯草芽孢杆菌基因组为模板,采用PCR的手段扩增得到葡萄糖脱氢酶基因gdh与已构建好的pKK223-3-mldh连接,转化E. coli JM109获得重组菌E. coli pKK223-3-gdh-mldh.SDS-PAGE结果表明羰基还原酶及葡萄糖脱氢酶均有表达其相对分子质量分别为43 kD和31 kD.液相检测重组菌细胞破碎液在不添加外源的葡萄糖脱氢酶的情况下能专一性转化1-苯基-2-甲氨基丙酮简称MAK为d-伪麻黄碱.全细胞转化实验表明0.1 g湿菌体与0.15 mg MAK及6 mg葡萄糖30 ℃反应10 h生成0.091 mg d-伪麻黄碱,MAK的摩尔转化率为67.4%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张梁	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	7	33	4.0	5.0
2	石贵阳	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	7	42	4.0	6.0
3	宇文伟刚	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	1	5	1.0	1.0
4	王正祥	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	8	78	5.0	8.0