基于LAMP技术针对溶藻弧菌gyrB基因快速检测方法的建立

• 作者: 侯兵兵 刘新萍 董优优 陈昌国 陈秋圆
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导等温扩增技术 弧菌 溶藻弧菌 快速检测 gyrB基因
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R378.3|Q503
• 字数: 2459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2019.06.002

摘要

目的 应用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立针对溶藻弧菌gyrB基因的快速检测方法.方法 以溶藻弧菌标准株(ATCC-17749)和溶藻弧菌野生株(WT)为研究对象,通过在线生物学软件(http://primerexplorer.jp/e/)设计针对溶藻弧菌gyrB基因的LAMP引物,利用恒温水浴进行等温扩增,优化反应条件,建立快速检测方法.结果 ①经2g/dl凝胶电泳结果显示反应温度为61℃时扩增产物成像效果较60℃,62℃和63℃明显,为适宜反应温度;②在61℃条件下反应60 min和90 min凝胶电泳成像效果差异不大,反应时间为60 min能满足扩增需要;③利用同一体系对临床6种其它常见致病菌进行等温扩增时未出现阳性条带,提示整个体系特异度较好;④采用模板稀释法验证该LAMP体系检测的灵敏度为10-4mg/L.结论 建立了基于LAMP技术针对溶藻弧菌gyrB基因的快速检测方法,具有良好的特异度和敏感度,对快速检测溶藻弧菌有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈昌国	解放军总医院第六医学中心检验科	1	0	0.0	0.0
2	陈秋圆	解放军总医院第六医学中心检验科	1	0	0.0	0.0
3	侯兵兵	解放军总医院第六医学中心检验科	1	0	0.0	0.0
4	刘新萍	解放军总医院第六医学中心检验科	1	0	0.0	0.0
5	董优优	解放军总医院第六医学中心检验科	1	0	0.0	0.0