胶原纤维的酶解液中羟脯氨酸含量测定方法的优化

• 作者: 卜德懿 张春晓 张茜 彭必雨 李艳红 田永鑫 鲜娇
• 来源期刊: 皮革科学与工程
• 学科: 工学
• 关键词: 蛋白酶 皮胶原蛋白 羟脯氨酸 比色法 氨基酸分析仪法
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 25-30
• 页数: 6页
• 分类号: TS57
• 字数: 5320字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19677/j.issn.1004-7964.2019.03.004

摘要

针对文献报道的测定蛋白水解液中羟脯氨酸含量的氯胺T显色法(比色法)中的操作条件不一致的问题,对该方法的关键条件进行了优化.用优化后的方法和氨基酸分析仪法(AA法)对系列皮粉和皮块蛋白酶水解液中的羟脯氨酸的含量进行了测定和比较.结果表明:优化后比色法的最适测定条件是:氧化时间5 min、显色时间15 min、消解时间4 h、样品pH 6.0～6.5;优化后的比色法的测定结果具有较好的重复性(RSD小于1.17%);比色法与AA法测定相同样品的结果比值在0.97～1.09之间,测定结果基本一致.与AA法相比,比色法具有快速、简便、成本低、易实现等优点,可以用于表征酶对胶原纤维的作用性能.