应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B

• 作者: 任芳 张尊平 张梦妍 胡国君 范旭东 董雅凤
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 葡萄病毒B 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 569-576
• 页数: 8页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000381

摘要

本研究建立了葡萄病毒B的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR (RT-qPCR)检测技术.该技术标准曲线扩增效率102.4％,相关系数0.999,最低检测限达104倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍.重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00％～0.65％和0.02％ ～ 2.00％,表明检测稳定性好.该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条和春夏秋季所有老叶柄样品检出率均为100％,与常规RT-PCR检测结果一致.对于其他季节或部位样品,RT-qPCR检出率(43％～74％)则普遍高于常规RT-PCR(5％～71％),特别是春季样品和春夏秋季所有嫩叶样品,检出率比常规RT-PCR分别高31％和38％.对来自我国13个省21个品种的52份田间葡萄样品检测结果表明,RT-qPCR共检测到6个样品为阳性,检出率11.5％,为常规RT-PCR(检出率5.8％)的2倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董雅凤	中国农业科学院果树研究所	17	105	6.0	10.0
2	张尊平	中国农业科学院果树研究所	12	8	1.0	2.0
3	范旭东	中国农业科学院果树研究所	11	0	0.0	0.0
4	任芳	中国农业科学院果树研究所	11	0	0.0	0.0
5	张梦妍	中国农业科学院果树研究所	3	0	0.0	0.0
6	胡国君	中国农业科学院果树研究所	11	1	1.0	1.0