利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究

• 作者: 冯力 刘平黄 尹灵丹 罗毅 薛美 郭珊珊 陈伟业
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪干扰素L3 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 昆虫细胞 猪流行性腹泻病毒
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1269-1276
• 页数: 8页
• 分类号: S852.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0156

摘要

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞上表达重组猪干扰素L3 (rPoIFN-L3)进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的研究.首先通过间接免疫荧光和Western-blot验证rPoIFN-L3表达,并用ProteinA亲和层析柱进行蛋白纯化;采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测rPoIFN-L3的抗病毒活性,含rPoIFN-L3的细胞上清的抗病毒活性为1×1o3 AU/mL,纯化的rPoIFN-L3抗病毒活性为5×105 AU/mg.进一步对纯化的rPoIFN-L3蛋白在IPEC-J2细胞上进行抗PEDV活性探究,结果显示,rPoIFN-L3可呈剂量依赖性抑制PEDV复制,并且上调相关干扰素-刺激基因(ISGs)的表达.由此证明,本研究表达的rPoIFN-L3具有抗病毒活性,并可有效抑制PEDV在IPEC-J2上的复制,对预防和治疗PEDV感染有重要意义.