microRNA-181通过靶向PTEN对胰腺泡细胞自噬及凋亡的影响及作用机制研究

• 作者: 吴天鸣 赵明一 陈涛
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-181a PTEN 胰腺炎 细胞自噬 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 215-223
• 页数: 9页
• 分类号: R576
• 字数: 7036字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2019.03.000

摘要

目的 探究对胰腺泡细胞自噬及凋亡的影响及作用机制.方法 用100 μmol/L的雨蛙素(cerulein)处理大鼠胰腺泡细胞AR42 J,miR-181a mimic及miRNA mock分别转染细胞后,RT-PCR检测miR-181a、PTEN表达水平.生物信息预测两者关系并用荧光素酶报告实验验证.细胞分为Control、cerulein、miR-181a mimic、pc-PTEN及miR-181a mimic+ pcDNA PTEN(pc-PTEN)组,miR-181a mimic及pc-PTEN转染细胞后,CCK8检测细胞活性,Hoechst染色检测细胞凋亡,Western印迹检测PTEN、PCNA、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-9、LC3、Beclin1、P62、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达,免疫荧光检测LC3表达.雷帕霉素与miR-181a mimic共处理细胞后,蛋白印迹检测LC3B、Beclin1及p62表达水平,CCK8检测细胞活性,Hoechst染色检测细胞凋亡.结果 雨蛙素可下调miR-181a及上调PTEN表达.miR-181a mimic可显著降低PTEN wt的荧光素酶活性.miR-181a mimic+ pc-PTEN能部分逆转pc-PTEN对PTEN和cleaved Caspase-9表达、凋亡细胞百分比、Bax/Bcl-2比值、PCNA表达、细胞存活率、LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值、Beclin1表达、LC3荧光值及p62表达的调节作用;同时,miR-181a mimic+ pc-PTEN还能逆转pc-PTEN对PI3K/AKT/mTOR信号通路激活的抑制作用.最后,Rapamycin+ miR-181a mimic能逆转miR-181a mimic对LC3B、Beclin1和细胞凋亡的抑制作用,及对p62和细胞存活率的促进作用.结论 miR-181a可通过靶向下调PTEN抑制胰腺泡细胞自噬及凋亡的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵明一	北京市大兴区人民医院普外科	5	17	3.0	4.0
2	陈涛	北京市大兴区人民医院普外科	6	20	3.0	4.0
3	吴天鸣	北京市朝阳医院肝胆外科	1	0	0.0	0.0