粪肠球菌Ace抗原表位预测及重组表位 疫苗载体构建与表达

• 作者: 和春昊 张晨昕 李滨洲 杨国宇 楚红燕 郭珍珍 陈丽颖
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 粪肠球菌 胶原蛋白黏附素 铁蛋白 纳米笼 表位
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 379-384
• 页数: 6页
• 分类号: S852.2
• 字数: 4966字
• 语种: 中文

摘要

利用生物信息学软件预测抗原表位,然后将筛选出的6个抗原表位基因片段分别与铁蛋白H亚基基因片段连接,并克隆到pET-32a表达载体中,构建能融合表达Ace抗原表位和铁蛋白H亚基的重组质粒pET-32a-ace1、pET-32a-ace2、pET-32a-ace3、pET-32a-ace4、pET-32a-ace5、pET-32a-ace6,并经测序验证;优化诱导条件获得原核表达的重组蛋白后,用SDS-PAGE和Western Blot验证其相对分子质量大小和免疫原性;将重组蛋白进行纯化超滤,然后进行透射电镜成像检查.结果显示,本研究成功构建了7种原核表达载体;在IPTG诱导下获得了5种可溶性表达的融合蛋白,且均有较强的免疫原性;重组融合蛋白Ace1-H、Ace3-H、Ace5-H和Ace6-H在透射电镜下观察到了具有与天然铁蛋白类似的特殊中空结构,且其直径与天然铁蛋白纳米笼类似;而带多表位的重组蛋白Ace-H虽然也能自组装成纳米级颗粒,但没有中空核心,其直径也比天然铁蛋白略大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨国宇	河南农业大学牧医工程学院	174	1205	16.0	28.0
2	陈丽颖	河南农业大学牧医工程学院	98	536	13.0	17.0
4	郭珍珍	河南农业大学牧医工程学院	5	8	2.0	2.0
5	和春昊	河南农业大学牧医工程学院	3	6	1.0	2.0
6	李滨洲	河南农业大学牧医工程学院	3	6	1.0	2.0
7	楚红燕	河南农业大学牧医工程学院	2	0	0.0	0.0
8	张晨昕	北京化工大学国际教育学院	1	0	0.0	0.0