猪伪狂犬病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及其冻干检测试剂的制备

• 作者: 伍建敏 侯月娥 叶平 李中圣 王凤求 王贵平 赵玉林
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 冻干检测试剂 TaqMan荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 4507字
• 语种: 中文

摘要

猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染猪引起的一种传染病,目前在我国广泛流行.本研究针对GenBank中PRV的gE基因序列进行比较分析,在其保守区设计了特异性探针和PCR引物,通过优化反应条件,建立了可以区别野毒株和基因缺失疫苗株的TaqMan荧光定量PCR检测方法.该方法可特异性地检测出野毒感染,而对基因缺失疫苗株、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒无检测信号;对PRV检测的灵敏度可达10个模板拷贝数,是普通PCR的100倍.通过优化的冻干工艺制备出PRV全预混PCR试剂,室温25℃保存3个月或37℃保存15d,敏感性仍为10个拷贝,推测储存于4℃的有效期约为24个月;利用手持单通道荧光PCR仪,可在42 min时间内完成核酸诊断.本研究基于TaqMan荧光定量PCR检测方法,结合核酸扩增体系冻干工艺制备的PRV PCR冻干试剂具有耐保存,便于运输,准确性高等特性,对快速诊断PRV和病毒定量检测具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王贵平		39	107	5.0	7.0
2	李中圣		21	53	4.0	5.0
3	侯月娥		14	51	4.0	6.0
4	叶平		5	2	1.0	1.0
5	伍建敏		8	24	3.0	4.0
6	王凤求		5	7	2.0	2.0
7	赵玉林		3	4	2.0	2.0