p38MAPK信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用

• 作者: 周睿曦 屈艺 李世平 李熙鸿 黄群
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 脓毒症 神经元 自噬 p38 MAPK信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 512-519
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用.方法 通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立大鼠脓毒症模型.SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(CLP组)、溶媒组(CLP+ Veh组)、p38MAPK抑制剂组(CLP+SB203580组),每组分为3、6、12、24和48 h亚组;CLP+ Veh组和CLP+ SB203580组分别侧脑室注射1％DMSO 5 μL和0.1 mmol/L SB203580 5 μL,注射后30 min建立CLP模型,sham组仅翻看盲肠后关腹,未做其他处理.监测大鼠生命体征,包括平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和心率(heart rate,HR);神经行为学评分了解大鼠的脑损伤情况;大鼠脑海马区组织HE染色观察病理改变;透射电镜下观察大鼠脑海马区神经元自噬过程;Western blot检测海马区微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ选择性自噬接头蛋白(p62/sequestosome-1,p62/SQSTM1)、MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activatedprotein kinase 2,MK-2)、磷酸化MK-2(phosphorylation MK-2,p-MK-2)的蛋白表达;免疫荧光染色观察大鼠海马区神经元LC3和p62/SQSTM1的表达.结果 在不同时间点,CLP组大鼠MAP低于、HR高于sham组,以造模后12h变化最明显;CLP组大鼠神经行为学评分最低,海马区组织病理改变明显,透射电镜下观察有较多自噬空泡形成.与CLP组比较,CLP+SB203580组大鼠神经行为学评分回升,海马区病理改变好转,透射电镜下自噬空泡中的包裹物降解;Western blot结果显示,与sham组比较,造模后CLP组大鼠海马组织LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,p62/SQSTM1表达下降,前者至12 h达到高峰,后者至12 h达到谷底,CLP+SB203580组与其它组相比,在造模12h时,大鼠海马组织LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,而p62/SQSTM1表达进一步下降(P＜0.05);免疫荧光法观察结果显示,海马区LC3和p62/SQSTM1在NeuN的定位及表达与Western blot所测得的结果一致.结论 脓毒症大鼠抑制p38 MAPK信号通路,可以使自噬进一步激活,对海马区神经元起到保护作用.