牛奶中活沙门氏菌BCAC-EMA-Rti-LAMP快速检测方法的研究

• 作者: 吴国平 张天添 林丽萍 舒梅 钟婵 陈鹄
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 牛奶 沙门氏菌 实时荧光环介导等温扩增法 蒙脱石封闭的活性炭 叠氮溴化乙锭
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 1192-1199
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 5355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2019139

摘要

研究以沙门氏菌的invA基因序列设计特异性引物,结合蒙脱石封闭的活性炭(BCAC)吸附、叠氮溴化乙锭(EMA)前处理牛奶样品,建立了一种基于实时荧光环介导等温扩增法(Rti-LAMP)非预增菌快速检测牛奶中低浓度活沙门氏菌的方法.以每份25 mL牛奶样品,人工模拟不同浓度沙门氏菌污染,用4.0 g蒙脱石封闭的活性炭吸附处理样品,然后对回收精制的细菌样品用4.0μg/mL EMA终浓度作用处理,提取细菌样品DNA用于Rti-LAMP扩增检测,该方法检测灵敏度为1×101 CFU/mL活沙门氏菌,整个检测过程约5 h.以沙门氏菌国标检测法为参照,采用BCAC-EMA-Rti-LAMP检测生鲜牛奶样品27份,结果显示:2种方法均检测到同一份沙门氏菌阳性牛奶样品,而BCAC-EMA-Rti-LAMP另检测到3份牛奶样品沙门氏菌阳性.研究表明,建立的BCAC-EMA-Rti-LAMP检测方法较国标检测法更灵敏、快速,可用于牛奶沙门氏菌污染的快速检测.