利用CRISPR/Cas9构建甲基丙二酸血症cblC型W203X突变小鼠模型

• 作者: 古霞 李思涛 梁普平 石聪聪 肖昕 郝虎 马飞
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 甲基丙二酸血症cblC型 CRISPR/Cas9技术 W203X突变 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 824-829
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2019.08.016

摘要

目的 利用CRISPR/Cas9技术构建与人甲基丙二酸血症cblC型W203X突变型一致的小鼠模型.方法 通过BLAST比对人和小鼠cblC基因和蛋白序列的保守性,应用CRISPR/Cas9技术进行小鼠受精卵显微注射,获得杂合子F1代小鼠,F1代小鼠通过杂交获得W203X纯合突变型小鼠,并对纯合突变型、同窝杂合型及野生型3种类型小鼠进行血代谢产物丙酰肉碱检测.结果 人和小鼠甲基丙二酸血症cblC型的致病基因MMACHC的核苷酸和氨基酸序列高度保守.通过CRISPR/Cas9技术成功获得W203X纯合突变型小鼠,该小鼠模型在生后24 h丙酰肉碱明显升高(P<0.001).结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建了与人甲基丙二酸血症cblC型W203X突变型一致的小鼠模型.