基于CRISPR/cas9系统高效编辑小鼠Galt基因

• 作者: 于鸿浩 付灿 岳鹏鹏 王小燕 郭俊璠 高进涛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: sgRNA CRISPR/Cas9系统 Galt 基因编辑 半乳糖血症
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 235-242
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2020-0237

摘要

GALT基因突变是人类I型半乳糖血症的主要病因.拟通过CRISPR/cas9系统打靶小鼠Galt基因以模拟人GALT基因突变,从而为建立精准模拟I型半乳糖血症的动物模型奠定基础.首先分析了我国I型半乳糖血症GALT基因的致病突变位点,并将其定位在小鼠Glat基因上,作为小鼠Galt基因的拟突变位点,然后根据拟突变位点区域的序列设计了sgRNA导向序列,构建sgRNA表达质粒,将其与cas9表达质粒共转染小鼠3T3细胞,通过嘌呤霉素和杀稻瘟菌素筛选阳性转染细胞,提取阳性细胞基因组DNA,PCR扩增打靶位点的DNA片段,通过TA克隆测序鉴定基因编辑情况并分析编辑效率.结果表明,3个sgRNA导向序列均可以通过CRISPR/Cas9系统高效编辑小鼠Galt基因,编辑效率为100％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高进涛	桂林医学院生物技术学院	8	26	3.0	5.0
2	王小燕	桂林医学院生物技术学院	4	0	0.0	0.0
3	于鸿浩	桂林医学院生物技术学院	8	1	1.0	1.0
4	岳鹏鹏	桂林医学院生物技术学院	8	1	1.0	1.0
5	付灿	桂林医学院生物技术学院	5	0	0.0	0.0
6	郭俊璠	桂林医学院生物技术学院	1	0	0.0	0.0