蓝舌病病毒血清Ⅰ型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定

• 作者: 宋子昂 廖德芳 李华春 李占鸿 杨恒 高林
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 蓝舌病病毒血清1型 主要结构蛋白 杆状病毒表达
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 77-84
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65+9.4
• 字数: 5431字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.05.015

摘要

为表达具有天然构象的蓝舌病病毒血清l型(BTV1)主要结构蛋白VP2、VP3、VP5和VP7,研制针对流行于我国的BTV1型毒株的病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)疫苗提供基础,将编码BTV1VP2和VP5蛋白的基因分别克隆到双表达载体pFastBacDual的启动子pPH和pP10下游,构建重组质粒pFastBacDual-BTV1-VP2-VP5,将重组质粒转化DH 10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒rBaemidBTV 1-VP2-VP5,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacBTV 1-VP2-VP5;按照同样策略,制备重组杆状病毒rBacBTV 1-VP3-VP7.使用兔抗BTV1-VP5蛋白多克隆抗体和鼠抗BTV-VP7蛋白单克隆抗体,分别对rBacBTV1-VP2-VP5和rBacBTV 1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行间接免疫荧光试验(IFA)检测,结果病毒感染细胞可见特异性荧光出现;使用兔抗BTV1-VP2蛋白多克隆抗体和兔抗BTV1-VP3蛋白多克隆抗体,分别对rBacBTV 1-VP2-VP5和rBacBTV 1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行Western-blot检测,可见相对分子质量约100 kDa左右的条带,大小与预期相符.IFA检测和Western Blot检测结果显示,BTV1 VP2、VP3、VP5和VP7蛋白均得以表达,且具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李华春	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	72	264	8.0	11.0
2	高林	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	19	33	4.0	5.0
3	廖德芳	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	33	131	7.0	10.0
4	李占鸿	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	8	0	0.0	0.0
5	杨恒	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	9	14	2.0	3.0
6	宋子昂	云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室	2	0	0.0	0.0