兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及活性鉴定

• 作者: 于雪 孙培姣 杨慧 武玉香 沈志强 王文秀 王玉茂 肖跃强
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 VP60 单克隆抗体 活性鉴定 定位
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|S858.291
• 字数: 3102字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2019.08.002

摘要

为制备兔出血症病毒VP60单克隆抗体,利用HEK 293T细胞瞬时表达VP60,免疫Balb/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选获得阳性克隆细胞株-5D11.利用血凝抑制(HI)、间接免疫荧光(IFA)和Western blot等方法对5D11分泌的单克隆抗体活性进行鉴定,并对其识别区域进行了定位.结果显示,5D11能抑制病毒凝集人"O"型红细胞,与杆状病毒表达的VP60蛋白发生特异性抗原抗体反应,且其识别VP60蛋白线性抗原表位,并定位于494 aa-579 aa区段.成功制备了抗VP60蛋白单克隆抗体,为开展病原学检测、流行病学研究等奠定了基础.