沙门氏菌LAMP可视化检测方法的建立

• 作者: 任彤 刘凤华 史雅然 尹羿 张灿 汪琳 蒲静 赵相鹏 高志强
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 沙门氏菌 LAMP 可视化检测 检疫
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 分类号: S851.3
• 字数: 3646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.02.018

摘要

为实现沙门氏菌的快速现场检测,根据沙门氏菌invA基因编码区序列,设计合成1套引物,通过对反应物浓度和反应条件优化,建立了沙门氏菌属特异性LAMP检测方法;通过对invA基因8个区域的6条引物配对进行等温扩增,并在反应体系中加入HNB来指示反应结果,实现了反应的快速闭管检测.灵敏度试验显示,建立的方法可以检出稀释至3.6×101 CFU/mL菌液所提取的DNA;特异性试验显示,建立的方法与大肠杆菌DNA、志贺氏菌DNA、布鲁氏菌试管凝集抗原DNA、炭疽沉淀抗原DNA以及猪链球菌2型DNA不发生交叉反应,但能检出鸡白痢、禽伤寒沙门氏菌凝集抗原以及马流产试管凝集抗原提取的DNA;重复性试验显示,3个稀释度菌液DNA的3次重复检测均为阳性;应用试验显示,从经增菌培养的200份进境猴粪拭子样品中检出阳性2份,与细菌分离鉴定检测结果一致.结果表明,所建立的方法敏感性和特异性较高,重复性满足实际要求,可用于进境动物样品的沙门氏菌检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘凤华		102	1154	19.0	29.0
2	张灿		16	10	2.0	2.0
3	史雅然		9	10	2.0	2.0
4	汪琳		5	41	2.0	5.0
5	高志强		2	2	1.0	1.0
6	任彤		1	2	1.0	1.0
7	赵相鹏		1	2	1.0	1.0
8	尹羿		1	2	1.0	1.0
9	蒲静		1	2	1.0	1.0