蓝舌病Ⅰ型病毒VP5蛋白的表达纯化及免疫原性分析

• 作者: 党伟华 刘燕凯 刘红亮 周景明 张改平 王爱萍 郭亚楠 陈玉梅
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 蓝舌病1型病毒 VP5蛋白 蛋白表达 蛋白纯化 条件优化 免疫分析
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 69-74,83
• 页数: 7页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.03.016

摘要

为分析蓝舌病Ⅰ型病毒(BTV-1) VP5蛋白的免疫原性,本研究构建了载体PET-28a-VP5并转化BL21(DE3),然后进行IPTG诱导表达,以及SDS-PAGE和Western-blot分析.结果 显示,重组VP5蛋白相对分子质量约为62 kDa,与预期结果一致.进一步优化条件,发现IPTG为0.2 mmol/L、温度为25℃、诱导6h时,重组蛋白在上清中表达量最高,通过Ni柱纯化获得的重组蛋白纯度约为75％.将纯化后的重组蛋白VP5分别以40μg/只和20μg/只免疫Balb/c小鼠,同时设置PBS为阴性对照,对三免后血清进行间接ELISA检测,发现高、低剂量免疫小鼠均能产生针对VP5蛋白的特异性抗体.用灭活BTV-1进行DOT-ELISA检测,发现其能与VP5蛋白免疫的小鼠血清发生特异性反应,说明利用大肠杆菌表达的重组蛋白VP5具有良好的免疫特性,这为进一步开展BTV相关研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱萍	郑州大学生命科学学院	48	183	8.0	11.0
2	张改平	郑州大学生命科学学院	20	40	4.0	6.0
3	周景明	郑州大学生命科学学院	33	141	7.0	10.0
4	刘红亮	郑州大学生命科学学院	8	11	3.0	3.0
5	陈玉梅	郑州大学生命科学学院	11	7	2.0	2.0
6	郭亚楠	郑州大学生命科学学院	9	22	3.0	4.0
7	刘燕凯	郑州大学生命科学学院	8	12	2.0	3.0
8	党伟华	郑州大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0