传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法的建立及其应用

• 作者: 何秀苗 陈博文 陈果 陈盛峰 陈艳艳 韦平
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒 RT-LAMP 实时浊度仪 检测
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 169-175
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0022

摘要

为建立一种用于快速检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)方法,设计了针对VP1基因保守序列的5组引物,采用荧光检测试剂通过实时浊度仪监测阳性扩增结果.结果 显示,从5组引物中筛选出了1组对IBDV有效扩增的引物,利用该引物能够在63℃、1h条件下实现IBDV VP1基因片段的特异性扩增,与其他病毒的核酸无扩增反应;样品RNA的最低检出量为5×10-5 ng/μL;利用建立的检测方法对14份临床样品进行检测,其阳性检出率为100％.结果 表明,建立的IBDV RT-LAMP检测方法具有快速、准确、特异性强、灵敏度高和便捷的特点,可用于IBD临床样品的检测.