霍乱弧菌三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 万莹 任亚玲 王亚磊 王权 蒋蔚 陈永军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 霍乱弧菌 ctx hly ompW 三重荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1143-1151
• 页数: 9页
• 分类号: S852.613
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0154

摘要

为建立一种基于TaqMan探针法定量检测霍乱弧菌的三重荧光定量PCR方法,以霍乱弧菌种特异性基因ompW和毒力基因ctx、hly为靶基因,分别设计特异性引物及相应的TaqMan探针.在ompW、ctx、hly探针的5'端分别标记CY5、FAM、HEX荧光报告基团,3'端均标记BHQ1荧光淬灭基团.结果 显示,本试验建立的三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/mL,重复性试验中每组变异系数均小于1.4％;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限也达到1×102 CFU/mL.结果 表明,本实验室建立的三重荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点,是高通量检测致病性霍乱弧菌的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	蒋蔚	中国农业科学院上海兽医研究所	25	104	6.0	9.0
3	陈永军	中国农业科学院上海兽医研究所	27	211	10.0	14.0
4	王亚磊	中国农业科学院上海兽医研究所	4	2	1.0	1.0
5	万莹	中国农业科学院上海兽医研究所	4	6	2.0	2.0
6	任亚玲	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0