Krüppel-Like Factor3(KLF3)基因对牛脂肪沉积的作用

• 作者: 宁越 成功 昝林森 郭红芳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 秦川牛 前脂肪细胞 KLF3 脂肪沉积
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1272-1281
• 页数: 10页
• 字数: 6012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2019.07.014

摘要

[目的]通过研究牛KLF3基因对牛脂肪分化和脂肪酸代谢关键基因表达量的作用,进而探讨KLF3基因对脂质沉积的影响.[方法]合成干扰siRNA,筛选得到KLF3基因干扰效率最高SiRNA,分离培养秦川牛肉用新品系新生牛前脂肪细胞生长至70％-90％汇合度时转染筛选得到的KLF3基因SiRNA和阴性对照SiRNA(NC),并进行诱导分化培养至第0天和第4天时,利用荧光定量PCR方法研究分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAhT/enhancer-binding proteins α,C/EBPα),脂肪酸代谢关键基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase α,ACCα)和脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)基因在牛脂肪细胞分化不同时期干扰KLF3基因处理组和对照组之间表达量的变化,同时在干扰KLF3基因处理并进行诱导脂肪细胞分化的第4天采用油红0染色法观察干扰KLF3基因处理组和对照组之间脂滴差异及采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定甘油三酯含量进一步确定KLF3基因对牛脂肪细胞分化和脂肪酸代谢的作用.[结果]KLF3-Si2具有最高的干扰效率达到73％.转染KLF3-Si2后PPARγ的表达量在牛脂肪细胞诱导分化的第0天和第4天与对照组相比分别下调了58％和37％,达到了差异极显著(P＜0.01),C/EBPα的表达量也分别下调了64％和41％,达到了差异极显著(P＜0.01).脂质代谢的关键基因FABP4的表达量与对照组相比在牛脂肪细胞诱导分化的第0天和第4天分别下调了89％和60％,而ACCα的表达量干扰KLF3处理组与对照组相比在脂肪细胞诱导分化第0天和第4天分别下调了50％和37％,而FAS的表达量则分别下调了73％和19％,都分别达到了差异极显著(P＜0.01).在牛脂肪细胞诱导分化第4天油红0染色和甘油三酯含量测定也发现干扰KLF3基因处理组与对照组相比脂滴减少,甘油三酯含量显著下降(P＜0.05).[结论]干扰牛KLF3基因可以抑制牛脂肪细胞分化和脂肪酸代谢关键基因表达量下调,进而影响脂肪的沉积.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁越	西北农林科技大学动物科技学院	6	12	2.0	3.0
2	郭红芳	西北农林科技大学动物科技学院	5	26	3.0	5.0