miR-499通过靶向调控PTEN基因减轻大鼠心肌损伤

• 作者: 王佳子 许海涛
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-499 PTEN基因 心肌细胞 缺血再灌注损伤
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1365-1371
• 页数: 7页
• 分类号: R541|R363.2
• 字数: 4358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.08.004

摘要

目的:探究微小RNA-499(miR-499)对PTEN基因的靶向作用以及在大鼠心肌损伤中的作用机制.方法:构建大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型,RT-qPCR检测miR-499表达水平的变化;分离培养原代心肌细胞,分别转染miR-499模拟物和siR-PTEN,加入过氧化氢刺激后用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测LDH释放量;分别使用TargetScan和萤光素酶实验预测验证miR-499和PTEN的靶向关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-499模拟物和抑制剂对PTEN的mRNA和蛋白表达水平的影响;共转染anti-miR-499和siR-PTEN至细胞内,CCK-8和LDH检测试剂盒检测心肌细胞在过氧化氢刺激下细胞活力和LDH的变化.结果:在大鼠心肌I/R损伤模型中,miR-499表达水平显著迅速提升,之后逐渐呈时间依赖性下降(P<0.05);miR-499模拟物和siR-PTEN使过氧化氢刺激下的心肌细胞活力显著提升,LDH释放量显著减少(P<0.05);miR-499可靶向调控PTEN,miR-499模拟物促使PTEN表达显著下调,miR-499抑制剂则使PTEN表达显著上调(P<0.05);转染siR-PTEN能够回补miR-499抑制剂对细胞的抑制作用(P<0.05).结论:miR-499可通过靶向PTEN减轻大鼠心肌细胞损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王佳子		1	1	1.0	1.0