解淀粉芽孢杆菌SC06与肠毒性大肠杆菌K88对IPEC-1细胞转运载体、紧密连接、凋亡和免疫相关基因表达的影响

• 作者: 刘容容 徐函 曹雪芳 曾忠花 李卫芬 汤俐
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 解淀粉芽孢杆菌SC06 肠毒性大肠杆菌K88 PEC-1细胞 基因表达 凋亡 炎症反应
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 分子营养
• 页码范围: 2267-2277
• 页数: 11页
• 分类号: S852.4
• 字数: 6529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2019.05.033

摘要

本试验以IPEC-1细胞为材料,探究解淀粉芽孢杆菌SC06(以下简称SC06)与肠毒性大肠杆菌K88(以下简称K88)对肠上皮屏障功能相关基因表达的影响.将IPEC-1细胞分为4个组并作不同处理:CK组为空白对照,不作处理;SC06组和SC06+K88组用含有108 CFU/mLSC06的DMEM/F12培养基先预处理6h,之后K88组和SC06+K88组加入含有108 CFU/mLK88的DMEM/F12培养基处理3h;乳酸脱氢酶(LDH)活性测定另设以含1％ Trinton X-100的DMEM/F12培养基处理的Trinton组为阳性对照.各组细胞均培养9h.结果 表明:1)与CK组相比,K88和SC06单独处理均显著降低了葡萄糖转运载体2(GLUT2)和小肽转运载体1(PepT1)基因的相对表达量(P＜0.05),SC06单独处理显著增加了丙氨酸/丝氨酸/半胱氨酸/苏氨酸转运载体2(ASCT2)和兴奋性氨基酸转运载体1(EAAC1)基因的相对表达量(P＜0.05);与K88单独处理相比,SC06预处理显著抑制了K88诱导的LDH活性和EAAC1基因相对表达量的增加(P＜0.05).2)与CK组相比,K88单独处理显著上调了闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)、闭合蛋白(occludin)基因的表达(P＜0.05),显著下调了密封蛋白(claudin)-3、claudin-4和黏蛋白-1(MUC1)基因的表达(P＜0.05);SC06单独处理显著上调了ZO-1、claudin-4基因的表达(P＜0.05);K88和SC06单独处理均显著促进了天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、凋亡相关因子(Fas)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因的表达(P＜0.05),显著抑制了天冬氨酸蛋白水解酶-9(caspase-9)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因的表达(P＜0.05),且K88单独处理还显著降低了天冬氨酸蛋白水解酶-8 (caspase-8)基因的表达(P＜0.05).与K88单独处理相比,SC06预处理显著阻止了由K88诱导的ZO-1、caspase-3和Bcl-2基因相对表达量的增加(P＜0.05)及claudin-3、claudin-4、MUC1、caspase-9和Bax基因相对表达量的降低(P＜0.05).3)与CK组相比,K88单独处理显著上调了肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及转化生长因子β(TGF-β)基因的表达(P＜0.05),并显著上调了核转录因子-KB-p50(NF-KB-p50)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、髓样分化因子88(MyD88)、核苷酸结合寡聚域1(NOD-1)及Toll样受体-4(TLR4)基因的表达(P＜0.05);SC06单独处理显著降低了IL-6、NOD1与Toll样受体-6(TLR6)基因的表达(P＜0.05),显著上调了TGF-β和MyD88基因的表达(P＜0.05).与K88单独处理相比,SC06预处理显著抑制了由K88导致的MyD88、NOD-1及TLR4基因相对表达量的增加(P＜0.05).综上所述,K88诱导IPEC-1细胞发生炎症反应,破坏肠上皮细胞的完整性,SC06在一定程度上有缓解作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐函	浙江大学动物科学学院饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室	3	9	2.0	3.0
2	曹雪芳	浙江大学动物科学学院饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室	2	22	1.0	2.0
3	刘容容	浙江大学动物科学学院饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室	1	1	1.0	1.0
4	曾忠花	浙江大学动物科学学院饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	汤俐	浙江大学动物科学学院饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室	1	1	1.0	1.0