呋喃它酮代谢物的可视化免疫亲和凝胶柱检测分析

• 作者: 何扩 张冬昊 李佳仪 赵桐桐 魏东
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 呋喃它酮 抗体 凝胶柱 特异性
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 304-310
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.9.040

摘要

为了建立一种用于检测动物源性食品中呋喃它酮代谢物(AMOZ)的可视化免疫亲和凝胶柱检测方法,利用对醛基苯甲酸(CPA)对AMOZ进行衍生处理得到衍生物CPAMOZ,制备CPAMOZ完全抗原,并通过免疫小鼠获取CPAMOZ多克隆抗体,使用间接ELISA法对抗体的效价及特异性进行测定.实验采用恒温振荡法将溴化氰活化的琼脂糖凝胶分别与CPAMOZ抗体、HRP抗体偶联制得CPAMOZ抗体胶和HRP抗体胶,作为亲和凝胶柱的检测层与质控层.建立AMOZ可视化免疫亲和凝胶柱分析方法,确定了该方法在酶标抗原的稀释倍数为5000、HRP胶稀释20倍、CPAMOZ抗体胶稀释15倍的条件下,达到最佳工作状态.实验结果表明CPAMOZ多克隆抗体效价为1:64000,IC50值为2.19μg/L,具有良好的灵敏度及特异性.建立的AMOZ可视化免疫亲和凝胶检测柱方法检测限为4μg/L,动物源实际样品中AMOZ的检测限为2μg/kg.该方法快速便捷,符合我国高通量筛选食品中AMOZ的要求.