HSG细胞中MBD2对AQP5表达的调控作用

• 作者: 刘旭倩 叶艳艳 聂敏海 贾颖 邓舒婷 陈中林 黄葳
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 干燥综合征 MBD2 AQP5 基因治疗
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 955-960
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2|R394.2|R781.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.201811163

摘要

目的 探讨人下颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)中,甲基化CpG结合域蛋白2 (menthyl-CpG-binding domain protein 2,MBD2)是否影响水通道蛋白调控-5(aquaporin 5,AQP5)的表达,为干燥综合征(Sj(o)gren's syndrome,SS)的治疗提供新的思路.方法 体外培养HSG细胞,通过AQP5的启动子质粒与MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒共转染HSG细胞,利用双荧光素酶报告基因系统检测AQP5启动子的活性;再用MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒转染HSG细胞,利用RT-PCR及Western blot技术检测MBD2和AQP5在mRNA水平及蛋白水平上表达的改变.结果 ①MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别上调49.30％和58.35％(P＜0.05),AQP5在mRNA水平上表达上调35.40％和471.19％(P＜0.05),蛋白水平上调56.16％和82.78％ (P＜0.05).结果表明:MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5启动子活性增加,AQP5表达上调.②MBD2过表达质粒转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别下调25.36％、30.52％及34.78％ (P＜0.05),AQP5在mRNA水平上表达下调8.06％和87.60％(过表达质粒1μg组与对照组相比无统计学意义,P＞0.05;过表达质粒2μg组与对照组相比差异有统计学意义P＜0.05),在蛋白水平上表达下调44.50％和53.18％(P＜0.05).实验结果表明:MBD2转染ASG细胞后,AQP5启动子活性降低,AQP5的表达下降(P＜0.05).结论 MBD2可以下调AQP5的表达,这与SS患者的AQP5表达趋势一致,因此MBD2可能成为干燥综合征基因治疗的新靶点.