人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

• 作者: 吕农华 徐方云 黄永红
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 胃肿瘤 水通道蛋白质5 转染
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 407-409
• 页数: 3页
• 字数: 3063字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2013.04.018

摘要

目的 构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达.方法采用基因重组技术将人AQP5 cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒.脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5 mRNA和蛋白表达.结果 双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功.AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5 mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05).结论 成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄永红	南昌大学第一附属医院消化内科	24	36	4.0	4.0
5	徐方云	南昌大学基础医学院病理生理教研室	25	143	5.0	11.0
6	吕农华	南昌大学第一附属医院消化内科	284	1574	18.0	26.0