人SPOP真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

• 作者: 曾春艳 罗时文
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 SPOP AGS细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（17）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 2335-2337
• 页数: 3页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2015.17.011

摘要

目的 构建人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒及稳定表达外源性人SPOP基因的人胃癌AGS细胞系.方法 采用基因重组技术将人SPOP cDNA插入真核表达载体pUB6/V5-HisB,构建人pUB6/V5-HisB真核表达质粒.脂质体介导空载体pUB6/V5-HisB和表达质粒pUB6/V5-HisB-SPOP分别转染人胃癌AGS细胞株,杀稻瘟菌素筛选阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测SPOP mRNA和蛋白表达.结果 双酶切和基因测序结果均证实人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒构建成功.SPOP转染组与空白对照组、空载体组比较,SPOP蛋白表达显著上调(P＜0.05).结论 成功构建人SPOP真核表达质粒并获得稳定表达SPOP基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究SPOP基因在胃癌发生发展中作用奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾春艳	南昌大学第一附属医院肿瘤科	8	32	3.0	5.0
2	罗时文	南昌大学第一附属医院科研中心	9	49	3.0	7.0