玻璃珠破碎法制备重组人CYP2C9酵母微粒体的条件优化

• 作者: Zeinab Abdelrahaman 千文 吴跃章 杨长青 池田胜也
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人CYP2C9酵母 微粒体 玻璃珠 双氯芬酸
• 年，卷（期）: 2019,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-12,18
• 页数: 6页
• 分类号: R969.1
• 字数: 4577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4721.2019.18.004

摘要

目的 通过优化玻璃珠破碎法的条件,制备最具活性的重组人CYP2C9酵母微粒体,从而为建立更加灵敏快捷的体外代谢筛选模型提供依据.方法 利用玻璃珠破碎的方法,制备重组人CYP2C9酵母微粒体.通过改变涡旋振荡次数和玻璃珠用量,优化制备微粒体的条件.用Lowry法测定微粒体中的蛋白含量,用CYP2C9的典型底物双氯芬酸与微粒体进行反应,以单位时间(h)内单位蛋白(mg/ml)所对应的双氯芬酸代谢物4-羟基双氯芬酸的生成量来确定微粒体的蛋白活性.结果 随着涡旋振荡次数和玻璃珠用量的增加,所制备微粒体蛋白的含量增加.当涡旋振荡次数为30次(每次涡旋振荡30 s,冷却60 s),玻璃珠用量为0.75 g时,代谢物生成量和单位时间单位蛋白所对应代谢物生成量最大,分别为1.21μg和0.06μg/[(mg/ml)·h].结论 玻璃珠破碎法制备重组人CYP2C9酵母微粒体的最佳条件为涡旋振荡30次(每次涡旋振荡30 s,冷却60 s)和0.75 g玻璃珠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨长青	中国药科大学基础医学与临床药学学院	23	86	6.0	8.0
3	吴跃章	中国药科大学基础医学与临床药学学院	2	1	1.0	1.0
4	Zeinab Abdelrahaman	中国药科大学基础医学与临床药学学院	1	0	0.0	0.0
5	千文		1	0	0.0	0.0