重组扬州鹅IFN-α的表达与活性研究

• 作者: 刘海侠 徐孝宙 曹霞 朱孟玲 王会聪 王岑 王永娟
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 扬州鹅 IFN-α 原核表达 真核表达 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 65-69
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4
• 字数: 3647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201905001

摘要

为获得具有抗病毒活性的鹅干扰素,本实验参考GenBank中鹅IFN-α基因序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增扬州鹅IFN-α的全基因.将去除信号肽的IFN-α克隆至pET32a(+)以构建pET-mGoIFN-α,重组菌经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后的蛋白(mGoIFN-α)免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法测定小鼠血清抗体效价,western blot检测抗体特异性.同时,将IFN-α全长基因克隆至pcDNA3.1(-)以构建pcDNA-GoIFN-α,间接免疫荧光试验检测rGoIFN-α在鹅胚成纤维细胞(GEF)中的表达,细胞病变抑制法检测其抗水泡性口炎病毒(VSV)活性.结果 显示:本研究扩增得到576 bp的扬州鹅IFN-α全基因与486bp的成熟基因片段;原核表达的mGoIFN-α为36.3 ku,免疫小鼠后可产生具有良好特异性与抗原活性的多克隆抗体,效价为1∶16000;pcDNA-GoIFN-α可在GEF中表达,并具有较高的抗VSV活性.本研究为制备安全、高效的重组鹅干扰素,为研制鹅病毒性疾病的新型生物制剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永娟		25	30	3.0	3.0
2	王岑	南京中医药大学翰林学院	4	1	1.0	1.0