蓝氏贾第鞭毛虫末端结合蛋白1基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘红宁 李幽美 李志敏 李汶霖 李淑凝 沈海娥 王洋 王鸿斌 赵旭安
• 来源期刊: 热带病与寄生虫学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫 末端结合蛋白1 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-24
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2302.2020.01.005

摘要

目的 克隆并原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lambia,简称贾第虫)末端结合蛋白1(End-bind-ing protein 1,geb1)基因,获得重组gEB1蛋白.方法 由于geb1基因无内含子,我们以C2株贾第虫基因组为模板,以国际标准株WB株geb1基因序列为参考序列,设计引物克隆geb1基因,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切与原核表达载体pET-28α(+)连接,转化感受态E.coli TOP10,经筛选和测序验证后导入大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导gEB1蛋白表达,产物经SDS-PAGE和Western blot进行检测和验证.结果 成功构建了表达C2株贾第虫geb1基因的原核表达载体pET-28α(+)-gEB1,转化入大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3),重组菌株经0.1 mmol/L IPTG,30℃低温诱导5 h,SDS-PAGE和Western blot显示,在相对分子量约29 KDa的位置出现目的 蛋白条带,与理论值一致.结论 用大肠杆菌成功表达了gEB1蛋白,为gEB1蛋白的功能研究和抗体制备提供了材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洋	华北理工大学生命科学学院	24	56	4.0	7.0
2	沈海娥	华北理工大学生命科学学院	6	4	2.0	2.0
3	李汶霖	华北理工大学临床医学院	2	0	0.0	0.0
4	李淑凝	华北理工大学临床医学院	2	0	0.0	0.0
5	王鸿斌	华北理工大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	李志敏	华北理工大学护理与康复学院	1	0	0.0	0.0
7	刘红宁	华北理工大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
8	李幽美	华北理工大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
9	赵旭安	华北理工大学临床医学院	1	0	0.0	0.0